Preparação de itens para autoclavagem: na preparação de itens para autoclavagem, os recipientes devem ser fechados e os artigos devem ser embalados em materiais que permitam a penetração do vapor. Grandes pacotes de curativos e grandes frascos de mídia exigem tempo extra para que o calor os penetre. Da mesma forma, a embalagem de muitos artigos juntos em uma autoclave prolonga o tempo de processamento até 60 minutos para garantir a esterilidade. É mais eficiente e mais seguro executar duas cargas separadas e não aglomeradas do que uma cheia. Não é recomendado o acondicionamento de objetos em papel alumínio porque pode interferir com a penetração do vapor. O vapor circula através de uma autoclave de uma saída de vapor para uma porta de evacuação de ar (figura). O calor úmido sob a forma de vapor pressurizado é considerado o método mais confiável para a destruição de todas as formas de vida, incluindo os esporos bacterianos. Este método é incorporado em um dispositivo chamado autoclave. Há mais de 100 anos, o microbiologista francês e alemão desenvolveu a autoclave como componente essencial de seus laboratórios. Necessidade de autoclavagem: uma esterilização confiável com calor úmido requer temperaturas acima da água fervente. Estas temperaturas elevadas são mais comumente alcançadas por vapor sob pressão em uma autoclave. O autoclave é o método preferido de esterilização, a menos que o material a ser esterilizado possa ser danificado pelo calor ou pela umidade. Eficácia da autoclave ou condições ótimas: a esterilização em uma autoclave é mais eficaz quando os organismos são contatados diretamente pelo vapor ou estão contidos em um pequeno volume de líquido aquoso (principalmente água). Sob estas condições, o vapor a uma pressão de cerca de 15 psi atingindo a temperatura (121 o C) matará todos os organismos e os seus endosporos em cerca de 15 minutos. Princípio do Autoclave: um princípio básico da química é que quando a pressão de um gás aumenta, a temperatura do gás aumenta proporcionalmente. Por exemplo, quando o vapor de fluxo livre a uma temperatura de 100 o C é colocado sob uma pressão de 1 atmosfera acima da pressão do nível do mar 8211, isto é, cerca de 15 libras de pressão por polegada quadrada (Psi) --- a temperatura subiu para 121 o C. Aumentar a pressão para 20 psi eleva a temperatura para 126 o C. A relação entre temperatura e pressão é mostrada na tabela 2. Assim, o vapor é um gás, aumentando a pressão em um sistema fechado aumenta a temperatura. À medida que as moléculas de água no vapor se tornam mais energizadas, a sua penetração aumenta substancialmente. Este princípio é usado para reduzir o tempo de cozimento na panela de pressão doméstica e para reduzir o tempo de esterilização na autoclave. É importante notar que o agente esterilizante é o calor úmido, e não a pressão. A Relação entre a Pressão e a Temperatura do Steam nas Regras de Nível do Mar implícitas para o Autoclave: a esterilização por autoclave é invariavelmente bem sucedida se for devidamente feita e se forem seguidas duas regras de senso comum: Primeiro, os artigos devem ser colocados na autoclave para que o vapor possa facilmente Penetre-os. Em segundo lugar, o ar deve ser evacuado para que a câmara se encha com vapor. Funcionamento da autoclave: a maioria das autoclaves contém uma câmara de esterilização em que os artigos são colocados e um revestimento de vapor onde o vapor é mantido. À medida que o vapor flui do revestimento de vapor para a câmara de esterilização, o ar frio é forçado a sair e uma válvula especial aumenta a pressão para 15 libras de polegada acima da pressão atmosférica normal. A temperatura aumenta para 121,5 o C, e as moléculas de água superaquecidas conduzem rapidamente o calor em microorganismos. O tempo de destruição da espora bacteriana mais resistente agora está reduzido para cerca de 15 minutos. Para objetos mais densos, podem ser necessários até 30 minutos de exposição. As condições devem ser cuidadosamente controladas ou podem ocorrer sérios problemas. Usos da autoclave: o autoclave é usado para esterilizar meios de cultura, instrumentos, curativos, equipamentos intravenosos, aplicadores, soluções, seringas, equipamentos de transfusão e vários outros itens que podem suportar altas temperaturas e pressões. O técnico de laboratório usa isso para esterilizar meios bacteriológicos e destruir culturas patogênicas. A autoclave é igualmente valiosa para produtos de vidro e metalware, e é um dos primeiros instrumentos pedidos quando um laboratório de microbiologia é estabelecido. As autoclaves também são usadas em grande escala industrial. As grandes autoclaves industriais são chamadas de retorts, mas o mesmo princípio se aplica à panela doméstica doméstica comum usada na conserva doméstica de alimentos Limitações e desvantagens da autoclave: a autoclave também possui certas limitações. Por exemplo, alguns produtos de plástico derretem em alta temperatura, e os instrumentos afiados muitas vezes se tornam aborrecidos. Além disso, a degradação de muitos produtos químicos durante o processo de esterilização e substâncias oleosas não podem ser tratadas porque não se misturam com a água. O calor requer tempo extra para alcançar o centro de materiais sólidos, como carnes canned, porque esses materiais não desenvolvem as eficientes correntes de convecção distribuidoras de calor que ocorrem em líquidos. O aquecimento de grandes recipientes também requer tempo extra. A Tabela 3 mostra os diferentes requisitos de tempo para esterilizar líquidos em vários tamanhos de recipientes. Ao contrário das soluções aquosas esterilizantes, esterilizar a superfície de um sólido requer que o vapor realmente entre em contato com ele. Indicador de realização de esterilização: vários métodos comercialmente disponíveis podem indicar se a esterilização foi alcançada por tratamento térmico. As autoclaves modernas possuem dispositivos para manter a pressão adequada e registrar a temperatura interna durante as operações. Independentemente da presença de tal dispositivo, o operador deve verificar a pressão periodicamente e manter a pressão apropriada. Reações químicas em que um indicador muda de cor quando os tempos e as temperaturas apropriados foram alcançados. Em alguns projetos, a palavra quotsterilequot ou quotautoclavedquot aparece em envelopes ou fitas. Essas fitas não são totalmente confiáveis porque não indicam quanto tempo as condições apropriadas foram mantidas. As fitas ou outros indicadores de esterilização devem ser colocados dentro e perto do centro de grandes pacotes de determinar se o calor os penetrou. Em outro método, uma pastilha contida dentro de um frasco de vidro derrete. Um teste amplamente utilizado consiste em preparações de espécies específicas de endosporas bacterianas, como Bacillus stearothermophilus, impregnadas em tiras de papel. A tira de esporos e uma ampola de meio estão incluídas em um frasco de plástico macio. O frasco para injectáveis é colocado no centro do material a ser esterilizado e autoclavado. Após a autoclave, estes podem então ser inoculados assepticamente em meios de cultura. O crescimento nos meios de cultura indica a sobrevivência dos endosporos e, portanto, o processamento inadequado. Outros projetos usam suspensões de endosporo que podem ser liberadas, após o aquecimento, em um meio de cultura circundante dentro do meio dentro do mesmo frasco para injectáveis. Pontos importantes a lembrar para autoclave: o vapor sob pressão não é esterilizado quando o ar não está completamente esgotado. Isso pode acontecer com o fechamento prematuro da válvula de ejeção autoclave automática. Os princípios da esterilização por calor têm uma influência direta na conservação doméstica. Para esterilizar produtos de vidro secos, ligaduras e similares, deve-se ter cuidado para garantir que o vapor entre em contato com todas as superfícies. Por exemplo, a folha de alumínio é impermeável ao vapor e não deve ser usada para envolver materiais secos que devem ser esterilizados. Em vez disso, deve ser usado papel. Também deve ser tomado cuidado para evitar a captura de ar Na parte inferior de um recipiente seco porque o ar preso não será substituído pelo vapor, que é mais leve do que o ar. O ar preso é o equivalente a um pequeno forno de ar quente, que, como veremos em breve, requer uma temperatura mais alta e maior tempo para esterilizar materiais. Os recipientes que podem prender o ar devem ser colocados em uma posição inclinada de modo que o vapor extinga o ar. Os produtos que não permitem a penetração por umidade, como óleo mineral ou vaselina, não são esterilizados pelos mesmos métodos que esterilizariam soluções aquosas. Esta precaução é necessária porque, quando um objeto é exposto ao calor, sua superfície fica quente muito mais rapidamente do que o seu centro. (Quando um grande pedaço de carne é assado, por exemplo, a superfície pode ser bem feita enquanto o centro permanece raro). Em grandes laboratórios e hospitais, onde grandes quantidades de materiais devem ser esterilizados, as autoclaves especiais, chamadas autoclaves de pré-vácuo, são muitas vezes usava. Esta máquina extrai o ar da câmara de esterilização no início do ciclo. O vapor saturado é então utilizado a uma temperatura de 132 o C a 134 o C a uma pressão de 28 a 30 lbin2. O tempo de esterilização agora está reduzido a apenas 4 minutos. Uma bomba de vácuo opera no final do ciclo para remover o vapor e secar a carga. As principais vantagens da autoclave prévia são o tempo de exposição mínimo para a esterilização, o tempo reduzido para completar o ciclo e os custos de esterilização são muito reduzidos. 16 comentários: O calor úmido sob a forma de vapor pressurizado é considerado o método mais confiável para a destruição de todas as formas de vida, incluindo os esporos bacterianos. Este método é incorporado em um dispositivo chamado autoclave. Obrigado por esta publicação. Um bom material muito útil me ajuda. E é utilizada 121 horas por 15 minutos. E mais tempo ou temp. Con esta temperatura também as proteínas podem desnaturar. Procedimentos de autoclave As autoclaves usam vapor pressurizado para destruir microorganismos e são os sistemas mais confiáveis disponíveis para a descontaminação de resíduos laboratoriais e a esterilização de produtos de vidro, mídia e reagentes de laboratório. Para uma transferência de calor eficiente, o vapor deve descarregar o ar da câmara da autoclave. Antes de usar a autoclave, verifique a tela de drenagem na parte inferior da câmara e limpe se estiver bloqueada. Se a tampa estiver bloqueada com detritos, pode formar uma camada de ar na parte inferior da autoclave, evitando o funcionamento eficiente. Seleção de recipiente Sacos de polipropileno. Comumente denominados sacos de risco biológico ou autoclave, estes sacos são resistentes a rasgos, mas podem ser perfurados ou explodir na autoclave. Portanto, coloque os sacos em um recipiente rígido durante o autoclave. Os sacos estão disponíveis em vários tamanhos e alguns são impressos com um indicador que muda de cor quando processado. Os sacos de polipropileno são impermeáveis ao vapor e, por esta razão, não devem ser torcidos e fechados, mas recolhidos frouxamente na parte superior e protegidos com uma grande tira de borracha ou fita autoclave. Isso criará uma abertura através da qual o vapor pode penetrar. Contentores e panelas de polipropileno. O polipropileno é um plástico capaz de suportar o autoclave, mas resistente à transferência de calor. Portanto, os materiais contidos em uma panela de polipropileno levará mais tempo para autoclave do que os mesmos materiais em uma panela de aço inoxidável. Para diminuir o tempo necessário para esterilizar o material nesses recipientes, remova a tampa (se aplicável). Vire o recipiente do seu lado quando possível. Selecione o recipiente com os lados mais baixos e o diâmetro mais largo possível para a autoclave. Recipientes e panelas de aço inoxidável. O aço inoxidável é um bom condutor de calor e é menos provável aumentar o tempo de esterilização, embora seja mais caro que o polipropileno. Preparação e carregamento de materiais Preencha os recipientes líquidos apenas meio cheios. Solte as tampas ou use fechos ventilados. Sempre coloque sacos de resíduos biológicos em panelas para pegar derrames. Posicione os sacos de risco biológico em seus lados, com o pescoço do saco gravado vagamente. Deixe espaço entre itens para permitir a circulação de vapor. Os dishpans domésticos derretem na autoclave. Use recipientes de polipropileno autoclaváveis ou em aço inoxidável. Seleção do ciclo Use o ciclo do líquido (escape lento) ao autoclavar líquidos, para evitar que o conteúdo ferva. Selecione o ciclo de exaustão rápido para produtos de vidro. Use o escape rápido e o ciclo seco para os itens embalados. Seleção de tempo Tome em consideração o tamanho dos artigos a serem autoclavados. Um frasco de 2 litros contendo 1 litro de líquido leva mais tempo para esterilizar do que quatro frascos de 500 mL contendo cada um 250 mL de líquido. O material com alta capacidade de isolamento (cama de animais, recipientes de polipropileno de lados altos) aumenta o tempo necessário para que a carga atinja temperaturas de esterilização. Os sacos de autoclave contendo resíduos biológicos devem ser autoclavados durante 50 minutos para assegurar a descontaminação. Removendo a carga Verifique se a pressão da câmara é zero. Use casaco de laboratório, proteção para os olhos, luvas isolantes de calor e sapatos com pés fechados. Fique de trás da porta ao abri-la. Abra lentamente a porta apenas uma fenda. Cuidado com a pressa de vapor. Após o ciclo de exaustão lento, abra a porta da autoclave e deixe os líquidos esfriarem por 20 minutos antes da remoção.
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